Protective effect of melatonin on damage in the sperm parameters of mice exposed to diazinon / Efecto protector de la melatonina sobre el daño en los parámetros espermáticos de ratones expuestos a diazinón

Since normal sperm parameters can be altered by organophosphorous pesticides, this study intended to determine if melatonin is able to prevent the damage on sperm quality after an acute exposure to diazinon. Adult male mice were injected intraperitoneally with melatonin, diazinon (1/3 or 2/3 LD50) or both, and sperm parameters were evaluated on days 1 or 32 post injection. Groups treated with diazinon showed elevated lipid peroxidation levels on day 1 post treatment, while groups pretreated with melatonin before diazinon showed no difference compared to control. Sperm count showed a significant decrease in both diazinon-treated groups only on day 32 post injection; no differences were observed in groups pretreated with melatonin prior to diazinon compared to control. The percentage of abnormal sperm morphology increased in the diazinon-treated groups only on day 32 postinjection. The administration of melatonin prior to exposure to diazinon prevents the alteration of sperm parameters commonly caused by organophosphates, possibly due to its antioxidant properties.

Debido a que los parámetros normales de los espermatozoides pueden ser alterados por algunos contaminantes como los pesticidas organofosforados, este estudio pretende determinar si melatonina es capaz de prevenir o proteger del daño en la calidad espermática, después de una exposición aguda a diazinon. Ratones machos adultos fueron inyectados via intraperitoneal con diazinon 1/3 y 2/3 de la LD50 y otro grupo tratados con melatonina + 1/3 diazinon LD50 y melatonina + 2/3 LD50. Los parámetros espermáticos fueron evaluados al día 1 y al día 32 post tratamiento. Los grupos tratados con diazinon solo o conjugado con melatonina mostraron un incremento significativo en los niveles de lipoperoxidación en el tratamiento después de un día. Al día 32 no se observan diferencias significativas con el grupo control. El recuento espermático al día 1 no presenta diferencias entre los grupos tratados y el control. Sin embargo al día 32 los grupos tratados con diazinon solo, muestran una disminución significativa, solo el grupo de melatonina +1/3 diazinon, presenta valores similares al grupo control. La morfología espermática normal presenta una disminución significativa en grupos tratados con diazinon, pero un aumento significativo al día 32 en los grupos tratados con melatonina. Los mayores porcentajes de anormalidades se presentan en la cabeza y la cola de los espermatozoides. La administración de melatonina antes de la exposición al diazinon evita las alteraciones de los parámetros espermáticos, comúnmente causada por organofosforados, posiblemente debido a sus propiedades antioxidantes.

Evaluación y estandarización de la calidad del espermiograma: nuevos límites inferiores de referencia / Evaluation and standardization of the quality of semen: new lower reference limit

El análisis seminal o espermiograma es uno de los parámetros más usados en la evaluación de la fertilidad masculina. La OMS (WHO, 2010), presentó el 5 Manual para el examen y procesamiento del semen humano, documento que fue analizado durante el primer taller de estandarización del análisis seminal (PLEAS), realizado en Santiago de Chile, mayo del 2010. Posteriormente se aplicaron los nuevos valores indicados como "límite de referencia inferior" (LIR), en el estudio del análisis seminal realizados por varios autores (2003 al 2010). Los resultados obtenidos indican que el 81 por ciento de los investigadores latino americanos creen que el nuevo manual estandariza mejor la concentración espermática, un 96 por ciento está de acuerdo con la nueva subclasificación en la motilidad espermática en progresiva (A), no progresiva (B) e inmóviles (C). El 68 por ciento estima que el mejor instrumental de recuento es la cámara de Neubauer. Respecto a los controles de calidad solo el 18 por ciento realiza controles de calidad externa. El 100 por ciento de los investigadores estima conveniente realizar continuos talleres de estandarización. Respecto a la aplicación de los LIR en las poblaciones en estudio, todos ellos cumplirían con los estándares actuales para ser considerada una población con capacidad de fertilidad. Sin embargo varios autores opinan que una nueva versión del manual OMS, debe realizarse urgentemente para estandarizar mejor la concentración espermática (15 millones por mL) y la morfología según criterios estrictos (4 por ciento), valores de referencia que consideran muy bajos.

Spermogram or semen analysis is one of the most used parameters in the evaluation of male fertility. WHO (2010) presented the 5th Manual for review and processing of human semen, a document that was discussed during the first workshop of standardization of semen analysis (PLEAS), held in Santiago de Chile, May 2010. Subsequently applied the new values expressed in "lower referencelimit" (LRL) for semen in several analysis studies conducted by various authors (2003 to 2010). The results indicate that 81 percent of Latin American researchers believe the new manual standardizes best sperm concentration, 96 percent agree with the new subclassification in progressive sperm motility (A), non-progressive (B) and immobile (C). 68 percent determined that the best instruments for the sperm countis the Neubauer haemocytometerchamber. Regarding quality control only 18 percent performed external quality control. 100 percent of researchers believe it is appropriate to conducton going standardization workshops. Regarding the application of LRL in the study populations (2003-2010), 100 percent comply with the standards to be considered a population with fertility capacity. However, several authors argue that a new version of the WHO manual, must be re-done urgently to better standardize sperm concentration (15 million/mL) and morphology according to strict criteria (4 percent), reference values considered very low.

Histological and functional organization in human testicle: expression of receptors c-kit and androgens / Organización histológica y funcional en el testículo humano: expresión de los receptores c-kit y andrógenos

The objective of this work was identify the presence of interstitial cells of Cajal, muscle cells, nerves and androgen receptor positive cells in adult human testicle, using immunohistochemical detection for c-kit/CD-117, actin smooth muscle specific (ASMS), neurofilament (N) and androgen receptor (AR), respectively. The samples were obtained from patients (n= 10) with diagnosis of prostate cancer, with surgery of orchiectomy. Subsequently were processed by histology and for immunohistochemistry using specific antibodies. It showed the presence of cells c-kit/CD-117, with diverse degrees of positivity, distributed mainly in the interstitial peritubular area of the human testicle. The peritubular myoides cells were positive to the presence of the actin smooth muscle and androgen receptor. The neurofilaments elements (+) only were observed in the vascular tunic. The specific immunohistochemistry describe the presence of the interstitial cells of Cajal in human testicular interstitium, opening a new perspective for the functional interpretation of the testicular cellularity and tubular motility. Possibly associated functionally to peribubulars cells of smooth muscle to regulate the mobility of the seminiferous tabules, whose integration and function would be androgen dependent. The cells that express the c-kit receptor, were found exclusively in the interstitial compartment. This cellular type in addition of the muscular cells of peritubules and the absence of nervous fibers to the interior of the testicle, could be responsible for the regulation of tubular mobility, as it happens in the gastrointestinal apparatus.

El objetivo de este trabajo fue identificar la presencia de células interticiales de Cajal, células musculares lisas, células nerviosas y células que expresan receptores de andrógeno en el testículo de humano adulto, usando inmunohistoquímica específica para: c-kit/CD-117, músculo liso actina específico (ASMS), neurofilamentos (N) y para receptores de andrógenos (AR). Las muestras fueron obtenidas de pacientes (n=10) con diagnóstico de cáncer prostático sometidos a cirugía de orquiectomía. Las biopsias se procesaron para histología e inmunohistoquímica usando anticuerpos específicos. Se muestra la presencia de células c-kit/CD-117, con diversos grados de positividad y distribuidas en el compartimento interticial del testículo. Las células peritubulares mioides fueron positivas para la presencia de músculo liso actina específico y para receptor de andrógenos. La marcación de neurofilamentos positivos, sólo fueron observados en la túnica vascular. Conclusiones: La inmunohistoquímica específica describe la presencia de células interticiales de Cajal en los interticios testiculares humanos, abriendo una nueva visión en la interpretación funcional de la celularidad testicular y la motilidad tubular. Lo anterior asociado a la funcionalidad de las células peritubulares (músculo liso) regularían la motilidad de los túbulos seminíferos. Este proceso posiblemente es andrógeno dependiente. Las células que expresan receptores c-kit se encuentran exclusivamente en los compartimentos interticiales, estas células en conjunto con las células musculares peritubulares agregado a la ausencia de fibras nerviosas al interior del testículo, podrían ser los responsables de la regulación de la motilidad tubular, similar a como se informa para el tracto gastrointestinal.

Histopathological and Histometrical Assessment of Boron Exposure Effects on Mouse Spermatogenesis / Evaluación Histopatológica e Histométrica del Efecto en la Espermatogénesis por Exposición a Boro

Boron is a chemical element widely used in many industrial activities. Exposure to it affects many organs in mammals, mainly reproductive male organs. This work evaluates boron effect in testis. For this purpose, 12mg Boron/L of drinking water, equivalent to Arica tap water, was given for 42 days to 85 days old CFl male mice (experimental group). Another group (control group) drunk tap water of Santiago (0.6mg Boron/L) was used. Testicular histopathology and morphometric analysis was done. These studies showed that Borum induces alterations such as epithelial vacuolization, blockage of the tubular lumen and atrophy. Morphometrical data showed that Borom induces also enlargement of tubular diameter, epithelial height and tubular lumen. Therefore, it is concluded that Boron acts as testicular toxicant and that further studies are needed to establish its mechanism of action upon spermatogenesis.

El Boro es un elemento químico ampliamente usado en variadas actividades industriales. La exposición a éste afecta a varios órganos en mamíferos, principalmente órganos reproductivos. Este trabajo evaluó los efectos del Boro en testículo. Para este propósito, 12mg Boro/Ide agua potable, equivalente al agua bebestible de Arica, se administró por 42 días a ratones machos CF1 de 85 días de edad (grupo experimental). Otro grupo (grupo control) bebió agua de Santiago (0.6mg Boro/L). Se realizaron estudios histopatológicos y morfométricos del testículo. Estos estudios mostraron que el Boro induce alteraciones como vacuolización epitelial, taponamiento y atrofia del lumen testicular. Los estudios morfométricos mostraron que el Boro también induce aumento del diámetro tubular, altura del epitelio y del lumen tubular. En consecuencia, se concluye que el Boro actúa como un tóxico testicular y que futuros estudios son necesarios para establecer su mecanismo de acción sobre la espermatogénesis.

Desmina en túbulos seminíferos seniles humanos / Desmin intermediate filaments types in aging human testicle

El envejecimiento lleva implícito un deterioro generalizado, que se expresa de distinta manera en cada órgano o tejido corporal, afectando algunas funciones en forma progresiva, como es la disminución de la eficacia sexual. En la organización celular, los filamentos intermedios son elementos claves en la regulación de la forma y función. específicamente, a nivel testicular la organización histofisiológica del compartimento peritubular es clave para el desarrollo de una espermatogénesis normal, donde se describe a la desmina como uno de los principales filamentos intermedios. Muestra de tejido testicular de individuos seniles mayores de 70 años (3) y con diagnóstico de cáncer prostático, fueron fijadas durante 12 horas en formol tamponado al 10 por ciento e incluidas en parafina, procesadas por técnicas histológicas para H-E e imnunohistoquímica con anticuerpos antidesmina, las que fueron reveladas con complejo avidina-biotina. La microscopía permitió la identificación diferencial y cuantificación de las células negativas y positivas, expresándose los valores en porcentajes (por ciento). Las células mioides mostraron reactividad entre 10 a 15 por ciento para Desmina, con un 81 por ciento concentrada en la lámina celular interna (células de mayor carácter muscular) y un 19 po ciento en la periferia (células de mayor carácter conectivo, tipo fibroblastos). Por lo tanto, las células del compartimento peritubular, revelan su carácter mesenquimático, presentando características propias de células musculares, pero que también pudieran diferenciarse hacia células conectivas tipo fibroblastos.